PCR 시 희석하는 PBS 용액

PBS(Phosphate-Buffered Saline) 용액으로 희석하는 이유는 다음과 같습니다.

1. 세포와 단백질 변성을 최소화

PBS는 pH 7.4로 완충되어 있어 세포 및 단백질이 안정적으로 유지됩니다. 전방액(Aqueous Humor)과 비슷한 삼투압과 pH를 제공하여, 세포 손상을 방지하면서 분석에 적합한 상태를 유지할 수 있습니다.

2. 전해질 균형 유지

PBS는 NaCl과 KCl을 포함하고 있어 체액과 유사한 이온 농도를 유지합니다. 이는 전방액 성분과 유사하여, 분석 시 세포 기능이나 단백질 구조에 영향을 덜 미칩니다.

3. 면역학적 및 생화학적 분석을 위한 적절한 희석 환경 제공

전방 천자로 얻은 시료는 단백질, 사이토카인, 염증 매개체 등을 분석하는 데 사용됩니다. PBS는 이들 분자의 구조와 기능을 유지하는 데 적합한 환경을 제공합니다.

4. 침전 방지 및 용해 촉진

전방액에는 섬유소, 단백질, 세포 파편 등이 포함될 수 있으며, 이는 분석 과정에서 침전될 가능성이 있습니다. PBS는 이러한 성분을 일정하게 분산시키는 역할을 하여, 분석이 더 균일하게 이루어지도록 도와줍니다.

5. 독성 및 세포 독성 최소화

PBS는 세포 독성이 없는 용액으로, 전방 천자 후 분석에 필요한 최소한의 환경 변화를 유도하면서도 조직 손상을 유발하지 않습니다.

🔹 BSS 대신 PBS를 사용하는 이유는?
BSS는 생체 환경을 모방하는 데 유리하지만, 중탄산염이 포함될 경우 pH가 변화할 가능성이 있고, 포도당이 포함될 경우 대사적 반응이 일어날 수 있습니다. 반면, PBS는 pH가 안정적이며, 불필요한 대사 과정이 일어나지 않아 분석 시 더 신뢰할 수 있는 결과를 얻을 수 있습니다.

즉, 전방 천자 시 PBS로 희석하는 이유는 생리학적 환경을 유지하면서도 분석을 방해할 가능성이 적기 때문입니다.

 

1. PBS (Phosphate-Buffered Saline)

• 주성분: 인산염(Phosphate), 염화나트륨(NaCl), 염화칼륨(KCl), 일부 조성에서는 마그네슘(Mg²⁺)과 칼슘(Ca²⁺) 포함
• pH 조절: 인산(Phosphate) 계열 완충제 사용 (일반적으로 pH 7.4)
• 용도:
  • 세포 배양에서 세포 세척
  • 면역학 실험(ELISA, Western blot)
  • DNA, RNA 추출 과정에서 사용
  • 생리학적 환경을 유지하면서도 삼투압 조절

2. BSS (Balanced Salt Solution)

• 주성분: 염화나트륨(NaCl), 칼륨(K⁺), 칼슘(Ca²⁺), 마그네슘(Mg²⁺), 포도당(Glucose) 또는 중탄산염(Bicarbonate) 포함
• pH 조절: 중탄산염(Bicarbonate) 또는 HEPES 완충제 사용
• 용도:
  • 안과 수술 및 세포 배양 시 사용
  • 각막 및 안구 조직의 세척 및 보존
  • 체액과 유사한 이온 조성을 유지하여 생체 환경을 모방

🔹 차이점 정리

구분	PBS	BSS
완충제	인산염(Phosphate)	중탄산염(Bicarbonate) 또는 HEPES
주요 성분	NaCl, KCl, Phosphate	NaCl, K⁺, Ca²⁺, Mg²⁺, 포도당 등
pH 조절	약 pH 7.4 고정	pH 조절 가능 (중탄산염)
주요 용도	실험실 세포 세척, 면역학 실험	안과 수술, 세포 배양 시 생체 환경 유지